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土壤高速冷冻离心机在土壤DNA提取中的应用

点击次数:94  发布时间:2022-11-08
  使用土壤高速冷冻离心机的所有转头都具有转头自锁功能,能够轻松装卸,同时所有转头都能够高温高压灭菌,保障了使用者的安全性。
  
  土壤高速冷冻离心机具体提取土壤DNA的步骤:
  
  一、土壤样本预处理:
  
  1、取500mg土壤样本至研磨管中。
  
  2、加入980µL缓冲液,轻柔涡旋混匀。
  
  3、加入120μL裂解液。
  
  4、将研磨管置于研磨仪中,40Hz处理40sec。
  
  5、12000rpm离心5min,沉淀碎片颗粒。
  
  6、转移上清液至2mL离心管中。加入250μL去蛋白液,手动摇晃混匀。4℃放置5min。
  
  7、12000rpm离心3min,之后取不多于900μL上清液,转移至2mL离心管中。
  
  8、加入1/3体积的结合液,轻柔涡旋混匀。4℃放置5min。
  
  9、12000rpm室温离心1min。转移上清液至5mL离心管中。
  
  10、加入1.5倍体积的缓冲液,立即吹打混匀。
  
  二、DNA提取:
  
  1、将DNA吸附柱套入2mL收集管中,备用。
  
  2、将预处理混合液加入到DNA吸附柱中,12,000rpm室温离心1min,弃掉废液。
  
  3、将DNA吸附柱放回收集管,加入600µL漂洗液,12,000rpm室温离心30sec,弃废液。
  
  4、重复一遍步骤3。
  
  5、将DNA吸附柱放回收集管,空柱12,000rpm离心2min,以除去残留的漂洗液。
  
  6、将DNA吸附柱放入新的洁净1.5mL离心管中,在滤膜中央加入30-100µL洗脱液,室温放置3min。然后12,000rpm离心1min,收集滤液即为样本DNA。
  
  7、DNA样品可置于-20℃短期保存,-80℃长期保存。
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